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          郵箱:info@kmdbioscience.com

           

          SARS-CoV-2假病毒采用表達新冠病毒刺突蛋白Spike的質粒,能夠表達新冠病毒的Spike刺突蛋白,后與靶細胞的ACE2結合,同時假病毒攜帶便于檢測的綠色熒光蛋白(GFP)報告基因以便檢測感染程度。此高純度病毒在篩選研究阻斷病毒入侵相關的中和抗體藥物、免疫效果評估等眾多科研實驗中都發揮著重要作用。

           假病毒只能單次感染,不能復制產生新的病毒,安全性高,可在P2級和常規實驗室使用。

           

          細胞級SARS-CoV-2假病毒液

           

          編號

          產品名稱

          保存溫度

          詢價

          KSARS-1001

          細胞級SARS-CoV-2假病毒液(WT)-GFP

          -80℃

          詢價

          KSARS-1001C

          細胞級SARS-CoV-2濃縮假病毒液(WT)-GFP

          -80℃

          詢價

          KSARS-1004

          細胞級SARS-CoV-2假病毒液(B.1.1.529)-LUC

          -80℃

          詢價

          KSARS-1011

          細胞級SARS-CoV-2假病毒液(B.1.617.2)-LUC

          -80℃

          詢價

          KSARS-1017

          細胞級SARS-CoV-2假病毒液(B.1.617.1)-LUC

          -80℃

          詢價

          KSARS-1022

          細胞級SARS-CoV-2假病毒液(B.1.351)-LUC

          -80℃

          詢價

          KSARS-1024

          細胞級SARS-CoV-2假病毒液(B.1.351)-GFP

          -80℃

          詢價

          KSARS-1031

          細胞級SARS-CoV-2假病毒液(P.1)-LUC

          -80℃

          詢價

          KSARS-1036

          細胞級SARS-CoV-2假病毒液(P.1)-GFP

          -80℃

          詢價

           

          參考實驗步驟

          1.將高表達hACE2的293T細胞接種在培養板中,接種細胞密度40%左右,37℃,5%CO2培養箱中過夜培養。
          2.感染前1小時更換含polybrene培養基,然后將不同稀釋比的待測樣本(如可能含中和抗體血清樣本,或純的中和抗體或待測藥物)與SARS-CoV-2假病毒混合均勻,37℃作用1h。

           

          細胞實驗假病毒建議用量

           

          96孔板

          24孔板

          12孔板

          6孔板

          10ul/孔

          40ul/孔

          80ul/孔

          160ul/孔

            

          3.將步驟2混合物加入到細胞培養基中并混勻,24小時后更換含有抗生素的新鮮培養基。
          4.假病毒感染72小時后,測定熒光素酶表達水平(試劑盒另行訂購),根據熒光素酶報告基因表達強度(RLU)計算并確定病毒感染水平。
          5.假病毒同時攜帶Puromycin的抗性基因,可以對假病毒感染后的細胞進行抗生素篩選,利用克隆形成率反映病毒感染水平
          。

            

          細胞級Lenti-hACE2預制病毒液

          慢病毒(Lentivirus)顆粒經過特殊純化工藝,滴度大于1E+9GC/ml  可以過表達人ACE2基因(hACE2)。通過感染目的細胞株并篩選獲得高表達hACE2蛋白受體的混合克隆和單克隆細胞株。

           使用方法

          1.細胞接種:將目的細胞接種在6孔培養板中,接種密度40%左右,DEME+10%胎牛血清培養基,37℃,5%CO2孵箱中培養24h,密度達到70-80%。

          2.病毒感染:用Lenti-hACE2病毒感染細胞,每孔建議使用量為1-5ul;如使用更大面積的培養板進行病毒感染及ACE2過表達細胞克隆篩選,根據培養板面積計算病毒用量。

          3.ACE2過表達細胞克隆篩選:病毒感染48H后,加入抗生素blasticidin篩選并獲得過表達hACE2混合克隆或單克隆細胞株,可通過Western Blot檢測hACE2的表達。

           

          編號

          產品名稱

          保存溫度

          詢價

          KhACE2-3011

          過表達hACE2慢病毒

          -80℃

          詢價

           

          參考實驗步驟

          1.將高表達hACE2的293T細胞接種在培養板中,接種細胞密度40%左右,37℃,5%CO2培養箱中過夜培養。
          2.感染前1小時更換含polybrene培養基,然后將不同稀釋比的待測樣本(如可能含中和抗體血清樣本,或純的中和抗體或待測藥物)與SARS-CoV-2假病毒混合均勻,37℃作用1h。


          細胞實驗假病毒建議用量

           

          96孔板

          24孔板

          12孔板

          6孔板

          10ul/孔

          40ul/孔

          80ul/孔

          160ul/孔

           

          3.將步驟2混合物加入到細胞培養基中并混勻,24小時后更換含有抗生素的新鮮培養基。
          4.假病毒感染72小時后,測定熒光素酶表達水平(試劑盒另行訂購),根據熒光素酶報告基因表達強度(RLU)計算并確定病毒感染水平。
          5.假病毒同時攜帶Puromycin的抗性基因,可以對假病毒感染后的細胞進行抗生素篩選,利用克隆形成率反映病毒感染水平。

           

          hACE2高表達293T細胞系

          制備過程:hACE2高表達293T細胞系是用Lenti-hACE2預制病毒液感染293T細胞,加入抗生素blasticidin篩選后獲得的單克隆293T細胞株。

          培養條件:高糖DMEM培養基+10%胎牛血清(推薦使用Gibco公司胎牛血清,貨號10019-141c),37,5%CO2孵箱中培養。

          產品用途:與SARS-CoV-2假病毒液配合使用,通過評估假病毒攜帶的報告基因表達水平,來檢測不同條件下(如添加新冠治療藥物或中和抗體情況下)假病毒對hACE2高表達293T細胞系的感染水平。

            

          編號

          產品名稱

          保存溫度

          詢價

          KhACE2-3058

          高表達hACE2單克隆細胞株

          液氮保存

          詢價

           

          參考實驗步驟

          1.將高表達hACE2的293T細胞接種在培養板中,接種細胞密度40%左右,37℃,5%CO2培養箱中過夜培養。
          2.感染前1小時更換含polybrene培養基,然后將不同稀釋比的待測樣本(如可能含中和抗體血清樣本,或純的中和抗體或待測藥物)與SARS-CoV-2假病毒混合均勻,37℃作用1h。

          細胞實驗假病毒建議用量

           

          96孔板

          24孔板

          12孔板

          6孔板

          10ul/孔

          40ul/孔

          80ul/孔

          160ul/孔

           

          3.將步驟2混合物加入到細胞培養基中并混勻,24小時后更換含有抗生素的新鮮培養基。
          4.假病毒感染72小時后,測定熒光素酶表達水平(試劑盒另行訂購),根據熒光素酶報告基因表達強度(RLU)計算并確定病毒感染水平。
          5.假病毒同時攜帶Puromycin的抗性基因,可以對假病毒感染后的細胞進行抗生素篩選,利用克隆形成率反映病毒感染水平。

           

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