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          IOS過表達穩轉細胞系構建服務

          卡梅德生物(KMD?Bioscience)多年來致力于細胞生物學技術研究。外源質粒DNA整合到宿主細胞染色體上,使宿主細胞可長期表達目的蛋白,稱為穩定細胞系。穩定細胞系的構建與篩選是研究目的基因的功能常用的手段。穩定細胞株的構建周期長、難度大,每一步都很關鍵,卡梅德生物在穩定細胞株構建方面積累了豐富的經驗,我們的細胞技術人員準確把控實驗環節中的每一步操作,對于難轉染的細胞采用電轉法可以做到較高的轉染效率,憑借其精湛技術能夠快速完成實驗內容,同時保證數據結果真實可靠??返律锝⒘藰藴实募毎夹g服務體系,具備成熟的細胞實驗服務平臺,服務內容豐富詳細,可為客戶提供包括過表達、沉默穩轉細胞系構建等多種技術服務。我們能夠按照客戶的要求完成目的基因過表達細胞株的構建和測試,提供高質量的基因過表達穩定細胞株。

          構建穩定細胞系的基本原理是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉染到宿主細胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標志進行篩選。常用的真核表達載體的篩選標志物有潮霉素(hygromycin),嘌呤霉素(puromycin)和 G418。穩定細胞系表達的蛋白/抗體具有穩定性好,批次差異性更小的優點。

          卡梅德生物具有成熟的IOS(Integration Operating System)重組技術,基于該技術,我們為您提供目的基因的過表達穩定株系構建服務。利用IOS技術,將目的基因定點整合到經過篩選驗證過的基因組高表達活性位點中, 這些位點不僅安全(無基因),而且基因表達量更高(活躍表達位點),因此可以實現目的基因過表達,并能長期穩定遺傳。實驗周期大大縮短,整合效率高。并且基因整合不限長度,可同時整合多個基因,實現多基因共表達。

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          技術原理:

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          項目

          IOS過表達穩轉細胞系構建服務

          實驗原理

          * IOS過表達穩轉細胞系技術原理:特異性的寡聚核苷酸序列識別靶基因,打開雙鏈,引起構象變化;專利的RP蛋白特異識別靶位點并與之結合,引起DNA損傷,從而啟動DNA損傷修復機制;同時,二聚體RP可牽引外源供體基因至損傷DNA處,提高了重組的幾率

          優點

          * 定點整合,非隨機整合

          * 穩定遺傳,傳代過程中,基因不會丟失

          * 基因大小不影響整合的效率

          * 定點整合的位點為高表達位點,基因的表達量高

          * 可同時整合多個基因,實現多基因共表達

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          1IOS基因重組技術原理圖

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          項目流程:

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          服務優勢:

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          --成熟穩定的細胞技術平臺:擁有品種齊全的細胞庫資源,多種不同啟動子和標簽的表達載體可供選擇

          --利用IOS技術,實驗周期大大縮短,整合效率高,基因整合穩定

          --設施齊全,擁有標準細胞實驗室,實驗體系成熟,配備齊全的實驗儀器

          --經驗豐富的實驗技術人員,精湛的操作水平,較好的電轉效率,成功率高,數據結果完善準確,可為您提供高品質的技術服務

          --細胞來源清晰,質量有保證:無細菌、真菌和支原體污染

          --具備完善的細胞、抗體、蛋白等服務平臺,能夠提供從載體設計到蛋白檢測等一站式技術服務

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          如何訂購?

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