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      O-聚糖分析服務

      卡梅德生物長期以來一直專注于優化我們的質譜技術平臺。我們開發了一條完整的蛋白質鑒定流程,從樣品制備、蛋白質分離純化、質量分析,最后到系統的生物信息學分析。

      糖基化是具有挑戰性的翻譯后修飾之一。它通常具有一組修改而不是單個修改。甚至肽上的單個糖基化位點也具有多個具有不同鏈長和連接的分支的聚糖異構體。O-聚糖主要通過末端單糖殘基與絲氨酸或蘇氨酸的OH基團之間的糖苷鍵與多肽連接。與 N-聚糖不同,O-連接的氨基酸共有序列尚不清楚。O-聚糖在結構上是多樣的,可以分為幾個具有相對異質核心結構的結構家族。

      與 N-聚糖不同,目前還沒有通用酶可以消化大多數 O-連接聚糖。O-聚糖酶僅去除未取代的二糖 O-GalNAc 引發的聚糖?;瘜W釋放主要是O-聚糖分離的方法。大多數O-聚糖從O-糖肽中釋放出來,即β-消除。

      O-聚糖分析通常使用 MALDI-TOF MS 進行。有必要通過全甲基化衍生 O-聚糖,以將所有羥基轉化為甲基醚,并通過其羧基的甲基酯化來穩定唾液酸。這使 MALDI TOF MS 能夠在正模式下分析所有 O-聚糖。將全甲基化的 O-聚糖直接注入質譜儀可以提供有關聚糖組成的信息。

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      3 檢測和分析的 O-聚糖結構示例

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      超過 60% 的治療性蛋白質在生物合成后通過添加 N-聚糖或 O-聚糖進行翻譯后修飾。有必要在有效的制造過程中表征聚糖,以保持持續的生物治療糖基化模式。在卡梅德生物,我們提供 O-聚糖分析服務,以支持治療性蛋白質的開發和商業化。

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      服務流程

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      --O-連接聚糖通常通過還原性堿性β-消除釋放

      --釋放的 O-聚糖可以通過親水相互作用色譜 (HILIC) 進行富集,每種聚糖形式的連接可以通過用特定的外切糖苷酶消化來確認

      --為了改進基于高效液相色譜 (HPLC) 和 MS 的聚糖分析,釋放的聚糖被 2-氨基苯甲酸 (2-AA) 或 2-氨基苯甲酰胺 (2-AB) 熒光標記

      --標記的 O-聚糖由 IHLIC 富集

      --然后通過 MALDI-TOF MS(基質輔助激光解吸/電離-飛行時間質譜儀)或 ESI-MS(電噴霧電離質譜儀)檢測富集的 O-聚糖

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      客戶提供

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      蛋白質

      至少100ug

      細胞

      至少1×10^7個

      動物組織

      至少1g

      植物組織

      至少200mg

      抗凝血 (EDTA)

      至少1ml

      血清

      血清0.2-0.5ml

      尿液

      至少2ml

      微生物樣品

      干重不低于200mg

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      服務優勢

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      --高靈敏度、可重現的 O-聚糖模式

      --相對較快的周轉時間

      --O-聚糖的高覆蓋率

      --處理復雜的生物基質,如細胞和組織

      --詳細報告包括實驗程序、液相色譜和質譜儀參數、MS 原始數據文件、O-聚糖分析結果和生物信息學分析

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      如何訂購?

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      福利电影

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