卡梅德生物科技（天津）有限公司
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郵箱：info@kmdbioscience.com
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卡梅德生物（KMD Bioscience）多年致力于重組蛋白表達與制備研究。我們的科學家擁有豐富的酵母（Yeast）蛋白重組表達、發酵和純化經驗，能夠快速為不同客戶定制蛋白酵母表達策略。 蛋白酵母表達系統兼具部分原核蛋白表達特征（培養條件簡單、生長速度快、表達水平高、操作簡便）和部分真核蛋白表達特征（蛋白翻譯后能進行正確加工、修飾，合理的空間折疊）。重組蛋白酵母表達系統的優勢主要表現在以下幾個方面：重組蛋白既可以分泌形式又可以非分泌形式在酵母系統中表達，且能高水平表達，達到5g/L；外源蛋白基因可以以整合的方式插入到酵母染色體上，隨染色體復制而不會丟失；酵母具有真核生物的亞細胞結構，具有糖基化、脂肪?；?、蛋白磷酸化等翻譯后修飾加工功能，適合活性蛋白表達；容易實現超高密度發酵，卡梅德生物能同時為客戶提供多種規格的蛋白酵母發酵規模，如500L發酵罐，配合我們的蛋白純化平臺，能夠在較短周期內獲得高質量的重組蛋白產品。 |
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蛋白酵母分泌表達步驟與周期?：
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步驟 |
服務內容 |
周期 |
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酵母表達載體亞克隆 |
* 密碼子優化，基因合成(或客戶提供質粒模板：目的基因擴增)
* 將目標基因亞克隆到合適的表達質粒上，可提供表達載體，如pPICZaA?、pGAPZaA、pPIC9K
* 拼接序列驗證：測序
* 交付：正確構建的重組表達質粒，含重組質粒的DH5α菌株及測序原始報告 |
1-2周 |
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酵母表達菌株轉化 |
* 可提供表達菌株：X33，GS115，釀酒酵母等
* 擴增培養5-10個陽性克隆并進行重組蛋白誘導表達 * SDS-PAGE交付：陽性克隆菌株及表達篩選結果報告 |
2周 |
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酵母表達菌株篩選 |
* 檢測重組蛋白表達情況（適用于多拷貝數和高表達菌株） * 交付：陽性克隆菌株及表達篩選結果報告 |
2周 |
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酵母表達菌株表達優化 |
* 對挑選出來的單克隆菌株，優化培養及誘導條件（培養基，菌體密度，甲醇濃度，誘導時間等），提高目標蛋白的表達量 |
2周 |
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小規模蛋白表達及純化 |
* 1L發酵液通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白 * SDS-PAGE交付：重組蛋白0.02-3mg及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒═ag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度>85% |
2-3周 |
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大規模蛋白表達及純化 |
* 10L，30L，80L，130L，500L發酵規模 |
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增值服務 |
* 通過HPLC，質譜等方法詳細檢測目標蛋白的質量
* 蛋白質N端測序：PPSQ31（Edman降解法測序儀） |
1-2周 |
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服務優勢：
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--密碼子優化：包含稀有密碼子分析，蛋白親水性分析和跨膜結構域的預測分析
--分泌蛋白表達，接近天然構象的重組蛋白
--多種規模蛋白發酵模式：小規模（500ml、10L）和大規模（80L、130L、250L和500L發酵罐）
--高純度毫克級，克級重組蛋白；穩定的批間一致性
--低內毒素：LAL檢測法<0.1EU/ug
--完整的GMP文件支撐體系，保證實驗信息可追溯
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如何訂購？
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