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          細胞凋亡檢測服務

          卡梅德生物(KMD?Bioscience)多年來致力于建立完善的細胞培養平臺,我們能夠提供給客戶多種細胞學基礎實驗。依托于優越的技術設備和完備的平臺搭建,能夠為客戶提供的細胞凋亡檢測服務。此外,我們的實驗室擁有先進的免疫熒光顯微鏡和流式細胞儀等系統,能為客戶提供高質量的成像技術,為您的科研結果增色。根據客戶的實際要求,卡梅德生物能夠建立一套完整的實驗方案,提供從細胞處理與制片,熒光顯微鏡觀測和拍照等一站式實驗服務,提升客戶體驗。

          細胞凋亡(Apoptosis)是指為維持內環境穩定,由基因控制的細胞自主的有序的死亡。作為細胞的一種基本生物學現象,細胞凋亡是機體為更好地適應生存環境,而主動爭取的一種死亡過程,是一個高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過程。它涉及一系列基因的激活、表達以及調控等的作用,一般過程包括4個階段,即:誘導啟動、細胞內調控、實施和凋亡細胞的吞噬搬運??返律锼峁┑募毎蛲鰴z測服務,可用于檢測不同類型、不同時期細胞凋亡狀況及分析凋亡細胞比例。針對凋亡時期不同,檢測的方法有所不同。

          卡梅德生物提供的凋亡檢測以“PI和Annexin-V雙標”方法為主。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能與PS高親和力特異性結合。我們將Annexin V 進行熒光素標記,以標記了的Annexin V作為熒光探針,利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發生。碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一種核酸染料,它不能透過完整的細胞膜,但對凋亡中晚期的細胞和死細胞,PI能夠透過細胞膜而使細胞核染紅。因此將采用Annexin V-PI雙標技術,就可以將處于不同凋亡時期的細胞區分開來。同時,依托自身的免疫熒光成像平臺,卡梅德生物能為客戶提供高質量的圖片數據。

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          細胞凋亡檢測服務 — Annexin V /PI雙染色法:

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          項目

          細胞凋亡檢測服務

          實驗原理

          * 在細胞凋亡早期,位于細胞膜內側的磷脂酰絲氨酸(Phosphatidyl serine,PS)遷移至細胞膜外測。磷脂結合蛋白V(Annexin V)是一種鈣依賴性的磷脂結合蛋白,它和PS具有高度的結合力。因此,Annexin V可以作為探針檢測暴露在細胞外測的磷脂酰絲氨酸。故利用對PS有高度親和力的Annexin V,將Annexin V標記上熒光素(如異硫氰酸熒光素FITC),用流式細胞儀即可檢測凋亡細胞。而PI染料能夠與細胞內的DNA結合,區分壞死細胞和活細胞。早期凋亡細胞和活細胞的細胞膜仍然完整,?PI染料無法自由通過細胞膜進入細胞內與DNA結合,所以PI染料無法標記凋亡細胞和活細胞,而PI染料卻能夠通過壞死細胞的細胞膜與細胞內的DNA結合,壞死細胞內PI染料被488nm激光激發后會發射紅熒光,被相應通道接收。所以Annexin V和PI同時使用,可以區分活細胞、早期凋亡細胞和壞死細胞。

          應用

          細胞凋亡檢測可應用于:

          * 腫瘤細胞和組織在內的不同種類病理標本研究

          * 臨床診療,新藥研制、生物制品開發、腫瘤放化療、以及從促凋亡角度探索腫瘤的基因治療

          * 對相關疾病的早期發現、放化療的療效評價

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          細胞凋亡檢測服務主要實驗流程:

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          服務優勢:

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          --保證細胞活力,制作高質量的細胞爬片

          --完善的實驗操作水平和實驗流程,實驗人員具有多年實驗成功經驗,對細胞研究具有豐富的知識儲備,能夠保證檢測結果客觀準確

          --提供詳細完整的實驗報告,包含實驗原始結果,每一項實驗參數,可直接用于論文的撰寫

          --完備的儀器平臺:擁有多類型顯微鏡和流式細胞儀等重要儀器,具有高分辨率等特點,節約珍貴樣本的同時即可獲得詳盡的數據

          --提供細胞培養、細胞染色和圖片拍照等一站式技術服務

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          實驗案例:

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